طريقة العمل على جهاز الاليزا

طريقة العمل على جهاز الاليزا: خطوات دقيقة وشرح مبسط

يُعد جهاز الإليزا (ELISA) أحد الأجهزة المخبرية المهمة المستخدمة في المختبرات الطبية والبحثية للكشف عن وجود أجسام مضادة أو مستضدات معينة في العينات البيولوجية. يعتمد الجهاز على تقنية المناعية الإنزيمية التي تضمن نتائج دقيقة وسريعة، وفي هذه المقالة سنتعرف بالتفصيل على طريقة العمل على جهاز الاليزا بشكل احترافي وواضح.

ما هو جهاز الإليزا وكيف يعمل؟

جهاز الإليزا (ELISA) هو اختصار لـ (Enzyme-linked Immunosorbent Assay)، وهو تقنية مختبرية حساسة تعتمد على تفاعل مناعي بين الأجسام المضادة والمستضدات. يُستخدم الجهاز للكشف عن وجود بروتينات أو أجسام مضادة في الدم أو البول أو عينات أخرى من الجسم، من خلال قياس التغير اللوني الناتج عن تفاعل إنزيمي محدد.

الأدوات والمعدات اللازمة للعمل على جهاز الاليزا

قبل البدء في استخدام جهاز الإليزا، يجب التأكد من توفر الأدوات والمعدات التالية:

• جهاز إليزا (قارئ الصفائح ELISA Reader)
• صفائح إليزا (96 بئراً)
• ماصات دقيقة (Micropipettes)
• محاليل غسل وتخفيف العينات (Wash buffers and diluents)
• المحاليل المعيارية والكواشف (Standards and reagents)
• حاضنة بدرجة حرارة مناسبة (Incubator)

تأكد دائمًا من جودة ونظافة الأدوات المستخدمة للحصول على نتائج دقيقة ومضمونة.

خطوات العمل التفصيلية على جهاز الاليزا

تتكون طريقة العمل على جهاز الاليزا من عدة خطوات متسلسلة يجب اتباعها بدقة لضمان صحة النتائج:

1. تحضير العينات وإضافتها للصفائح

قم بتخفيف العينات حسب البروتوكول المرفق مع الجهاز والكواشف، ثم أضفها إلى آبار صفيحة الإليزا باستخدام الماصة الدقيقة بشكل دقيق ومتساوٍ. احرص على وضع عينات التحكم والمعايير في أماكنها الصحيحة.

2. الحضانة الأولى والغسيل

ضع الصفيحة في الحاضنة عند درجة حرارة محددة (عادةً 37 درجة مئوية) لفترة زمنية محددة وفق البروتوكول. بعد انتهاء فترة الحضانة، اغسل الصفيحة جيدًا بالمحلول الخاص لإزالة أي مواد غير مرتبطة.

3. إضافة الأجسام المضادة المرتبطة بالإنزيم

أضف محلول الأجسام المضادة المرتبطة بالإنزيم إلى الآبار، ثم قم بحضانة الصفيحة مرة أخرى حسب التعليمات المحددة، مما يسمح بتكوين ارتباط بين الأجسام المضادة الإنزيمية والمستضد المستهدف.

4. الغسيل الثاني وإضافة المادة الركيزة (Substrate)

بعد انتهاء فترة الحضانة الثانية، اغسل الصفيحة مرة أخرى جيدًا لإزالة الأجسام المضادة غير المرتبطة. ثم أضف المادة الركيزة التي تتفاعل مع الإنزيم لتكوين لون يمكن قياس شدته.

5. إيقاف التفاعل وقراءة النتائج

بعد مرور الوقت المحدد للتفاعل اللوني، قم بإضافة محلول إيقاف التفاعل. بعدها ضع الصفيحة داخل قارئ الصفائح ELISA Reader لقياس الامتصاص الضوئي وتسجيل النتائج.

نصائح هامة لضمان دقة نتائج جهاز الاليزا

للحصول على نتائج دقيقة وموثوقة عند العمل على جهاز الإليزا، اتبع النصائح التالية:

• الالتزام الدقيق بالبروتوكولات والتعليمات المرفقة مع الجهاز والكواشف.
• استخدام محاليل وأدوات نظيفة ومعقمة.
• معايرة الجهاز بانتظام والتحقق من دقته.
• تسجيل النتائج بدقة ومقارنتها مع العينات القياسية.

تطبيقات واستخدامات جهاز الإليزا في المختبرات الطبية

يستخدم جهاز الإليزا بشكل واسع في المختبرات الطبية والبحثية للعديد من التطبيقات منها:

• تشخيص الأمراض المعدية مثل التهاب الكبد الفيروسي والإيدز.
• الكشف عن الحساسية وبعض أمراض المناعة الذاتية.
• مراقبة مستويات الهرمونات والبروتينات في الجسم.
• البحوث العلمية المتعلقة بالمناعة والجزيئات الحيوية.

الخلاصة

تُعد طريقة العمل على جهاز الاليزا تقنية دقيقة وحساسة تتطلب اتباع خطوات محددة ومنظمة للحصول على نتائج صحيحة ودقيقة. باتباعك للإرشادات المذكورة أعلاه والالتزام بالنصائح والتوصيات العلمية، ستتمكن من استخدام هذا الجهاز بكفاءة عالية وتحقيق نتائج موثوقة تلبي احتياجاتك البحثية والطبية.

المراجع والمصادر

1. Crowther, J.R. (2008). The ELISA Guidebook. Humana Press, Totowa, NJ, USA.
2. Thermo Fisher Scientific. "ELISA Technical Guide and Protocols." Retrieved from: https://www.thermofisher.com/sa/en/home/life-science/protein-biology/protein-assays-analysis/elisa/elisa-protocol.html
3. Gan, S.D., & Patel, K.R. (2013). Enzyme immunoassay and enzyme-linked immunosorbent assay. Journal of Investigative Dermatology, 133(9), e12.